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酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集
2011-10-26
1763
酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集用于ELISA测定的临床标本zui为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前使用血清(浆)标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4:00—6:00之间,会有一峰值出现;生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发...
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酶标抗体的质量鉴定与保存
2011-10-24
1934
酶标抗体的质量鉴定与保存1.酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2.酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403´0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.42)´0.94´0.62其中,0.42为酶蛋白本身(0.3)及结合戊二醛后增加的OD值,0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后,OD280约增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0时为0.62.过碘酸钠标记法I...
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ELISA法检测干扰素
2011-10-20
1867
ELISA法检测干扰素干扰素(IFN)是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质,仅在同种细胞上发挥作用。根据其来源、理化及生物学性质的不同,可分为IFN-α、IFN-β、IFN-γ3种干扰素。其中,IFN-α主要由白细胞产生,IFN-β由成纤维细胞产生,IFN-γ主要由T细胞在免疫应答中受到抗原或丝裂原活化后分泌产生。3种干扰素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用较强,IFN-丁免疫调节作用较强。目前已可用基因重组技术制备干扰素投入临床使用。干扰素不能直接灭活病毒,其抗病毒作用是由于...
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通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
2011-10-18
2633
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆经过3~4轮的筛选后,应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言,在后几轮的筛选中,每次获得的噬菌体总量都会增加,但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是zui灵敏的鉴定所获取的噬菌体克隆结合特异性的方法之一。受体被包被在各孔中,与之结合的噬菌体通过辣根过氧化物酶偶联的抗M13噬菌体抗体检测。只含有捕获抗体或者...
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ABC-ELISA材料和方法
2011-10-12
1887
BAS酶联免疫吸附试验材料和方法(以筛选抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体为例)1材料(1)空肠弯曲菌共同抗原提取物,自制。BAS酶联免疫吸附试验材料和方法(2)生物素化羊抗鼠IgG(BSAMG),卫生部上海生物制品所。(3)ABC试剂,卫生部上海生物制品所。如ABC试剂需自己配制,可按说明要求,将亲和素与酶标生物素按一定比例混合,置37℃孵育30min后使用。(4)被检杂交瘤培养物上清液。(5)其他试剂及器材同常规ELISA法。BAS酶联免疫吸附试验材料和方法2方法ABCEL...
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ELISA质量控制--室内质量控制程序
2011-10-11
1767
临床检验的检测结果,每次或每天之间不可能*。决定允许的误差范围,以临床上不造成误诊与漏诊为准,通过以下步骤来确定质控范围。ELISA质量控制--室内质量控制程序一、*条件下的测定误差*条件下已知值质控血清变异(optimalconditionsvariance,简称OCV)的测定:在本实验室*条件下(包括操作者、试剂、仪器等)检测质控血清20-30次,测得结果计算,求出该组数据的均值和标准差(SD)表示该实验室的*工作质量。现举例说明HBsAgELISA法检测时OCV的测定。...