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PCR-ELISA法诊断禽流感
2011-11-3
2291
PCR-ELISA法诊断禽流感PCR-ELISA是将一步RT-PCR技术与酶联免疫吸附法相结合,检测病毒的一项诊断技术。PCR的一对引物中,其中一个用生物素标记、另一个用地高辛标记,在酶标微孔板上用亲和素包被,PCR扩增后纯化片段加入微孔板中。此时,微孔板上包被的亲和素将与生物素标记引物上的生物素特异性结合而捕捉了PCR片段,然后在微IL板中加入辣根过氧化物酶标记的抗地高辛抗体,该抗体将与地高辛标记引物上的地高辛结合,从而形成亲和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗体-辣... -
酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断猪囊尾蚴病病
2011-11-1
2758
酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断猪囊尾蚴病病目前实验室开发的新型检测方法主要是以ELISA及改良的ELISA为主。分别用5种不同改良的ELISA平行检测囊虫抗体:ABC-ELISA、经典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA,试验结果差异不显著,说明方法学的选择主要依据习惯和试验的目的。N.S.Odashima(2002)用ELISA法诊断不同的患者群血清中抗体的种类,发现ELISA—lgG敏感度zui高,分别达到88.5%和93.2%,这说明该方... -
酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集
2011-10-26
2038
酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集用于ELISA测定的临床标本zui为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前使用血清(浆)标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4:00—6:00之间,会有一峰值出现;生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发... -
酶标抗体的质量鉴定与保存
2011-10-24
2281
酶标抗体的质量鉴定与保存1.酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2.酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403´0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.42)´0.94´0.62其中,0.42为酶蛋白本身(0.3)及结合戊二醛后增加的OD值,0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后,OD280约增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0时为0.62.过碘酸钠标记法I... -
ELISA法检测干扰素
2011-10-20
2121
ELISA法检测干扰素干扰素(IFN)是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质,仅在同种细胞上发挥作用。根据其来源、理化及生物学性质的不同,可分为IFN-α、IFN-β、IFN-γ3种干扰素。其中,IFN-α主要由白细胞产生,IFN-β由成纤维细胞产生,IFN-γ主要由T细胞在免疫应答中受到抗原或丝裂原活化后分泌产生。3种干扰素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用较强,IFN-丁免疫调节作用较强。目前已可用基因重组技术制备干扰素投入临床使用。干扰素不能直接灭活病毒,其抗病毒作用是由于... -
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
2011-10-18
2916
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆经过3~4轮的筛选后,应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言,在后几轮的筛选中,每次获得的噬菌体总量都会增加,但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是zui灵敏的鉴定所获取的噬菌体克隆结合特异性的方法之一。受体被包被在各孔中,与之结合的噬菌体通过辣根过氧化物酶偶联的抗M13噬菌体抗体检测。只含有捕获抗体或者...

