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ELISA中的试剂-免疫吸附剂
2010-3-26
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临床检验中一般采用商品盒进行测定。ELISA中有三个必要的:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的ELISA盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。3.1免疫吸附剂已包被抗原或的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月。有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或...
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实验室日常小技巧集锦
2010-3-25
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平时在实验室zui常听到的一句话就是“今天某某试验没做好是为什么?今天某某试验没出结果是什么原因?今天某某试验为什么会是这样的呢?”等等。然后仔细一查找原因,往往是由于操作上面的不认真,或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋友的一些经验,与大家分享:1跑page胶的时候,小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。2.提取质粒的时候,zui后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切...
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ELISA中的试剂-酶的底物
2010-3-24
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ELISA中的试剂-酶的底物酶的底物3.3.1HRP的底物HRP催化过氧化物的氧化反应,代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下:DH2+H2O2D+H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O-phenylenediamine,OPD)、四甲基联苯胺(3,3\\',5,5\\'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2\\'-azino...
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蛋白质提取方法
2010-3-23
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蛋白质提取方法-------列举10种方法一、植物组织蛋白质提取方法(summer)1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮...
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巴西三位一体的生物柴油战略
2010-3-22
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有害气体排放超标、气候变暖、石油价格居高不下、可再生资源日渐匮乏……面对一系列生态难题,人类该如何应付?生物柴油正日益成为能源发展的新选择。然而,对于大规模采用生物柴油这一战略选择,究竟利大于弊,还是弊大于利,众说纷纭。权衡标准也呈现多样性:一是商业标准,发展生物柴油是否经济;二是生态标准,生物柴油是否是对环境健康的能源;三是社会标准,即发展生物柴油是否有利于社会问题的缓解。巴西是世界大规模开发生物柴油zui早的国家,巴西发展生物柴油,实现“能源—环境—社会”三位一体的发展生...
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酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备
2010-1-31
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酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中,zui易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外,酶结合物的质量亦是影响试剂盒质量的很重要的因素之一,可见酶结合物的制备对于酶免疫测定来说,是非常关键的一个环节。酶—抗体(或其他大分子蛋白)结合物是酶免疫测定的有机组成部分,也是其测定基础之所在。通常,酶结合物(酶标抗体或抗原)一般均是通过化学交联而得...