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心得体会:组织样本的western blot,这十点需要注意
2021-4-28
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利用组织样本来进行Westernblot,这是许多实验室常常开展的工作。不过,若是想获得重复可靠的印迹结果,也绝非易事。在此,Bio-Rad的专家贡献了一些经验,可以帮助您获得清晰的图像和可靠的数据。1.快速处理组织使用干净的工具来收集和处理组织样本。为了去除可能影响蛋白稳定性的污染物,用预冷的中性缓冲液简单洗涤。洗涤后,在液氮中快速冷冻组织,以便保留蛋白的结构和特征,比如翻译后修饰(PTM)。组织样本可保存在冰上,立即匀浆处理。若保存在–20°C,蛋白仍然有可能降解,因此组...
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Elisa试剂盒竞争法测抗原的原理与步骤
2021-4-21
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Elisa试剂盒竞争法测抗原的原理与步骤当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗...
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细菌富集培养基和真菌富集培养基有什么区别?
2021-4-14
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为了获得单一类型微生物,即纯培养物,微生物学家通常采用称作富集培养的技术。为了富集,首先要选择好适合对象微生物的培养基,称为选择性培养基。例如,当我们想分离有固氮作用的细菌时,在培养基中可以加糖,但不能用含氮的营养物。又如培养厌氧菌时要隔绝氧气,而好氧菌则要保证通气。此外,某些特定微生物需要特殊的营养物,例如许多致病菌必须在培养基中加入血清,有些微生物又需要特定的维生素。还有细菌、放线菌的生长繁殖一般要求偏碱(7.0~7.5),霉菌和酵母菌要求偏酸(4.5~6);分离放线菌时...
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做到几下几点 可保证Elisa试剂盒的检测结果正确
2021-2-25
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Elisa试剂盒具有敏感性高,特异性强,快速等特点,目前广泛应用于农兽药、真菌残留检测。但该方法从加样、洗板、显色到读数步骤繁多,其中任何一步控制不好都可能影响检测结果的准确性。因此,在实际测定操作中一定要注意以下几点。一、温度1.试剂盒回温大多数ELISA检测试剂盒为冷藏(2℃-8℃)保存。从冰箱拿出来后,先不要急于打开试剂盒,要等试剂盒的温度平衡至室温且试剂盒盒表面无冷凝水。检测所用的试剂需充分混匀且*溶解后再用。提前1~2小时取出试剂盒,放在室温中;或在预设25℃恒温培...
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你的还原糖检测做对了吗?
2021-2-20
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能够还原斐林(H.vonFehling)试剂(本尼迪特试剂)或托伦斯(B.Tollens)试剂的糖称为还原糖,所有的单糖(除二羟丙酮),不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖,蔗糖例外。斐林试剂是含Cu2+络合物的溶液,被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后能生成单质银,发生“银镜反应”。分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或游离酮基)的糖,叫还原糖。如葡萄糖。果糖含有游离的酮基,所以果糖也属于还原糖。还原性质一般情况下,单糖的还原能力主要来自它的醛基,...
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为什么你的化学试剂变质那么快?
2021-2-5
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化学试剂在贮存过程中是否会发生变质,取决于内外两个方面的因素,内因是试剂本身化学结构所决定的理化性质;外因则是试剂所处的环境条件。要做到合理保管,一要了解试剂结构与性质间关系,二要创造适应试剂贮存的外部环境。化学试剂变质的原因环境主要是指贮存的温度、光照和介质。介质一般是指空气和混有的杂质。贮存室里除空气中含有的氧、二氧化碳和水蒸气以外,还往往含有存放的各种挥发性试剂扩散到空气中的蒸气,常见的有氯化氢、硝酸、硫化氢、二氧化硫、溴、dian、乙烯、甲醛等蒸气;另外还有飘混在空气...