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ELISA试剂盒实验操作中可能影响结果的原因及解决办法

2017-12-04 [1509]

ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在广泛的运用,但操作中的各个环节对试验的检测作用影响较大,如不留意,有可能导致显色不全、花板等成果。远将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下。

ELISA试剂盒试验操作中可能影响成果的原因及解决办法剖析:
1 挑选试剂
挑选质量的检测试剂,严格依照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样可能原因:
1)血清或血浆标本分离欠好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时刻过长(特别是室内温度较高时);
3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。

ELISA试剂盒解决办法:
1) 标本为血清:将血液先天然寄存1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管,采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次,放置一段时刻后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
4) 如果选用AT或其他全自动加样,挑选FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3、孵育可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸腾,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时刻人为延伸,导致非特异性结合紧附于反响孔周围,难以清洗*。
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