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ELISA试剂盒规范品怎么正确溶解与稀释?
点击次数:206 发布时间:2017/12/25

ELISA试剂盒规范曲线是结果核算的尺子,规范品是ELISA 试验成功与否的要害点。怎样正确溶解、稀释规范品呢?
1. 粉末规范品时间短离心,让因运送沾到管盖、管壁的规范品沉到管底。
2. 依据瓶标签参加一定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震动,室温静置溶解 10-30min,让粉末彻底溶解。
留意:加水后暂不必移液枪吹吸,防止蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待彻底溶解后可吹吸或涡旋振动混匀。
3. 规范品梯度稀释:
(1)规范品稀释液的挑选:
若血清、血浆、安排匀浆样本,用试剂盒中的规范品稀释液,梯度稀释规范品。
若细胞上清样本,主张用细胞培养基梯度稀释规范品。
(2)耗材预备:预备8个1.5Ml离心管,写上S1-S7、空白。
(3)梯度稀释:依据说明书,每管参加等体积的规范品稀释液(培养基)。汲取同体积溶解好的规范品到S1管中,吹打10次混匀,涡旋5S。从S1管中汲取同体积溶液到 S2管,吹打10次混匀,涡旋5s。同法稀释S3-S7浓度。
(4)空白: 规范品稀释液(培养基)作为空白即零浓度。
留意:梯度稀释规范品时,涡旋震动混匀后可时间短离心,让到盖子、壁上的液体到管底,再开端稀释下个浓度。
规范品溶解、梯度稀释是ELISA试验要害点,按以上方法梯度稀释就可!
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