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小鼠ELISA试剂盒的测定进程

2019-08-13 [1044]

小鼠ELISA试剂盒操作要素对ELISA试剂盒的影响ELISA试剂盒测定进程:
固相包被→加待测样品→温育→洗刷+加酶标物→温育→洗刷→加底物→温育一加间断液→比色→断定效果。
ELISA试剂盒操作较冗繁,在操作中应留神以下5个方面。
1. 在成批手工检测中,还应留神操作时差的影响。加样及混匀时刻的差异,使抗原抗体反响和酶促反响时刻不一起,对竞争法及定量检测影响很大,不留神可能会导致差错效果或定量禁绝。
2. 洗刷是ELISA试剂盒操作进程中决议试验成败的一个要害进程。意图是除去未结合的免疫反响物,间断抗原抗体反响,除去标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响进程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗刷质量较好,各反响孔洗刷效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应留神控制各孔洗刷效果,差异不宜太大。
3. 跟着病况的开展或由其他要素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅不坚定,因此有必要对标本进行预处理。直接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。
4. 加样一般运用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,避免穿插污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。
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