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研域生物讲解如何完善ELISA试剂盒实验中的过失

2022-05-07 [753]

研域生物讲解如何完善ELISA试剂盒实验中的过失


ELISA试剂盒价格实验操作步骤多,新手操作难免会有过失,而这些过失很多是由细节不够好造成的,减少过失的方法有很多,比如做实验时少说话,防止唾液掉进酶标条中,当然,大家还要学会自己发掘问题,找出原因。


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那么我们要如何完善elisa试剂盒实验中的过失? 


1.评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要,在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。


2.操作前仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作,不同批号的试剂不可混用,值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进,比如洗板次数的掌握等。


3.加样要准确、快速,加样不准确,酶生成物的量不能确定,直接影响显色结果,另外,显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重,要求在一定时间内加样完毕的实验,如果加样迟缓,便出现误差,而且试剂长时间暴露在外,尤其室温过高时,保存期会缩短甚至失效。


4.检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验,能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。


5.使用校对过的微量移液器,排除自然误差,移液器准确与否对定量检测尤为重要。


6.严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性,超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关,加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。