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ELISA试剂盒操作技巧以及操作步骤

2024-08-08 [1184]

想要得出正确结论我们就必须严格按照要求来进行实验操作,尤其是相关注意事项。接下来为大家说一下ELISA试剂盒操作注意事项。

ELISA试剂盒操作技巧:

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等,要先检查水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。

2.正确运用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反响孔壁上,加样器吸头要清洗洁净,避免污染,加样次序要与说明书共同,否则可导致成果错误,试验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗刷次数不要超越说明书引荐的洗刷次数,洗液在反响孑L内停留的时刻不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,形成孔问污染,导致假阴性或假阳性。

4.要确保加液量共同 咱们在运用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量禁绝,形成显色不统一,判别错误。

5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反响,显色液量不能过多,以免显色过强。

ELISA试剂盒实验操作步骤:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.