ELISA试剂盒的洗版解答问题

ELISA试剂盒的洗版解答问题

问题一：说明书上说洗板时要把孔里的水甩干，可我做的时候，无论我怎么拍，孔底还是有残留液体，请问这对试验有没有影响？或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题？

答：有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好，会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干,而且尽量少拍,不一定每次都很干,但是*后一次洗涤要尽量干.洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡. 如果有条件的话，可用洗板机。

问题二：什么才叫封闭好了呢?有没有什么标准?

答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果还有非特异反应的话，可能有其他原因，比如加样时溅到了壁上或有气泡，洗涤不充分，二抗浓度过高，封闭物不合适以及反应条件是否得当等。

问题三：1%bsa,你是用什么稀释的,我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释,结果封闭的效果都不怎么明显,与不封闭差不多.

答：1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作，背景高不一定是封闭的问题。

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