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ELISA试剂盒的使用说明书

2015-08-24 [1542]

     以前检测一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的,现在给我十个八个的从包被到显色,一个工作日基本搞定。可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目,本人在刚开始做ELISA试剂盒时就面对良多灾题,固然有师兄师姐铺路,但仍是经常做得乌烟瘴气,好比说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空缺还低。
     常用封锁剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下*可不可以应用到自己试验当中去。ELISA试剂盒但*选用什么,要依据试验详细来实践。应留意以下原理:因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附长短特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。         

     可用作ELISA试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份,ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。 ELISA试剂盒测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。