大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书

大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书 
试剂盒组成
1包被微孔板：一块。
2酶标记物：1
瓶[6.0mL]，有效期内使用。
3底物Ⅰ：1
瓶[6.0mL]，有效期内使用。
4底物Ⅱ：1
瓶[6.0mL]，有效期内使用。
5浓缩清洗液[1：10
蒸馏水或纯净水稀释]：1
瓶[50mL]，有效期内使用。
6终止液：1
瓶[6.0mL]，有效期内使用。
7标准品：5
瓶[1.0mL/瓶]，有效期内使用。
8 检测范围及各标准品浓度：0，50，100，250，500pg/mL。
大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书需要但未提供的试剂和器材
◆水温箱或恒温箱
◆标准规格酶标仪
◆自动洗板机
◆样本稀释液
◆可调节移液器及配套吸头
◆蒸馏水和容量瓶
◆无菌试管
◆ 震荡器及磁力搅拌器
◆ 封板膜
注意事项
1在试验之前要将试剂盒在室温下平衡至少30分钟。
2使用之前一定要首先确认试剂盒内所有试剂均为正常状态再进行后面的操作。
3如有问题或不懂之处请务必与供货商进行沟通，否则造成的任何损失均与本司
无关。
4 不要重复使用手中的吸头和试管以及混淆各组分瓶盖，否则会引起交叉污染，
导致试验失败。
5该试剂盒内不包含有传染性试剂。
6不要混用不同指标不同批号的试剂和包被微孔板。
7试验过程中试剂和待测样品均应充分混匀。
8包被微孔板应放置2-8℃干燥保存，避免受潮。
9如有剩余试剂请放置2-8℃冷藏保存。
10试验过程要严格按照说明书操作，先后顺序不得颠倒。
11如果样品量较大应注意加样时间，避免加样过慢或间隔时间过长。
12使用和贮存底物Ⅱ时应注意避光。
13终止液含有酸性成分具有腐蚀性，勿将其溅落到皮肤或衣服上。如有该情况发生应立即使用冷水冲洗。
14试验期间室内温度应始终保持在20-25℃。并保持室内清洁，无粉尘。
15避免直接接触试剂盒内的液体，一旦接触请尽快用水清洗。
16在试验过程中不要吸烟、使用化妆品和吃喝。这将对操作者的健康及试验结果造成影响。
17不要用嘴吸取试剂瓶内的试剂。
大鼠白介素-1ELISA试剂盒说明书样品的采集和制备
1 收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本储存在2-8℃备用,如有特殊原因需要周期检测,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存,并避免反复冻融。样本2-8℃可保存48小时,-20℃条件下可保存1个月，-70
℃条件下可保存6个月。
2每个样品量收集体积[100ul×需检测的指标，注：样品体积为处理后可进行zui终实验的样品体积]。
3 [血清]操作过程中避免受到刺激，使用非焦化和不含有内毒素的试管，静脉穿刺收集血
液并迅速离心，
分离出血清[2000-3000×g离心20分钟]。如有沉淀形成，应再次离心，具体离心的时间和转速应根据样品来决定。zui终实验的样品应为干净透明状的。
4 [血浆]可使用
EDTA[2.0%EDTA.Na2]来抗凝血浆并用于检测，混合10-20分钟后,离心祛除颗粒[2000-3000×g离心20分钟]。如有沉淀形成，应再次离心，具体离心的时间和转速应根据样品来决定。zui终实验的样品应为干净透明状的。
5 [组织匀浆/细胞培养液（分泌性成分）]使用无菌管收集。离心后取上清液[2000-3000×g离心20分钟]。如有沉淀形成，应再次离心，具体离心的时间和转速应根据样品来决定。zui终实验的样品应为干净透明状的。 组织匀浆:切割标本，称取质量。加入PBS[7.0-7.4]充分混合，具体的混合比例由操作者自行决定或可参考相关文献，如有问题也可与供货商咨询沟通后再进行后续操作。混合后的缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶），充分混合。 细胞培养液（胞内成分）:应先用
PBS[7.0-7.4]稀释细胞悬液,使细胞浓度达到 100万/mL左右,使用细胞裂解液或通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。如有沉淀形成，应再次离心。
6 [体液]离心后祛除颗粒和聚合物[2000-3000×g离心20分钟]。如有沉淀形成，应再次离心。具体离心的时间和转速应根据样品来决定。zui终实验的样品应为干净透明状的。
7 不要使用高脂血症、溶血、污染或灭活的样品，这样有可能会导致出现错误的结果。