ELISA试剂盒法在实验中手工测定的影响因素分析


ELISA试剂盒法多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,相对于其它检测方法,ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,但是在一些测定实验中,结果会出现误差影响测定结果。这篇文章总结了很多的实验经验从几个方面分析影响结果的因素。
ELISA试剂盒法在实验中手工测定的影响因素分析
(1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判。(2)加样时注意勿触及包被板底部,以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性。(3)洗涤不充分,会使结果假性增高,过分洗涤呈假阴性。(4)比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬季板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色,水汽或孔内气泡也会使OD值升高。(5)抗原与抗体反应达到*平衡,依赖于温度与时间。温度高于45℃易引起失活及标记物脱落,温度低于4℃,影响反应速度。
如何让ELISA试剂盒系统在实验中更稳定的方法
检测系统可谓是免疫学反应应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段。自己也为此苦恼过很长一段时间,跟着自己技术水平得进步,或多或少地也把握了ELISA体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做ELISA已是轻车熟路了,以前检测一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的,现在给我十个八个的从包被到显色,一个工作日基本搞定。可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目,本人在刚开始做ELISA时就面对良多灾题,固然有师兄师姐铺路,但仍是经常做得乌烟瘴气,好比说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空缺还低。