ELISA试剂盒的运输工作

ELISA试剂盒的运输工作
1.简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2.适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶。
3.回收率一般在50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
4.跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。
运输及保存    常温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂      无
ELISA试剂盒使用方法      
1. 按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性蛋白电泳。
2. 切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的胶块转移到1.5 mL塑料离心管中。
4.用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5.加入200 uL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时（夜）。此时将溶液B放在冰箱预冷。
6.10,000 g离心10分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8.-20℃放置至少10-30分钟。
9.室温12,000 g离心5-20分钟，弃上清。
10.ELISA试剂盒室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验（2-D电泳、质谱测序等）。