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微量加样器(移液器)使用的一般原则
2011-11-25
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微量加样器(移液器)使用的一般原则在免疫测定及其他生物医学研究中,加样器的使用离不开一次性的塑料吸头,尽管一次性塑料吸头的使用增加了实验费用,但降低了实验技术人员接触传染性病原体及有害实验材料如放射性核素的可能性,并且避免了吸头多次重复使用所必需的清洁过程和腐蚀性去垢剂的使用。此外,在有些应用上,如PCR测定中,吸头必须是一次性的,以避免潜在污染发生的可能性。加样器根据使用的要求,也在不断发展。如可整体高压灭菌加样器的出现。使用UV线稳定的塑料制作加样器对于加样器在许多方面的... -
酶标记抗体法标记抗体的制备
2011-11-22
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酶标记抗体法标记抗体的制备酶标记抗体法(enzaymelabelledantibodytechnique)是用结合物将酶结合在抗体分子上,制备成酶标记抗体,通过抗原—抗体反应使抗原—抗体复合物上带有酶分子,再借助酶对底物的特异性催化作用,在抗原—抗体反应部位形成不溶性有色产物,用于研究抗原物质分布和性质。酶标记抗体法又分为直接法和间接法,目前应用zui多的酶是辣根过氧化酶(HRP),底物是3,3’—二氨基联苯胺(DAB)。抗体蛋白分子与酶分子(如HRP或AKP)以一定的方式相... -
哺乳动物细胞的RNAi技术策略
2011-11-16
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哺乳动物细胞的RNAi技术策略目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关RNAi技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要来自于《遗传》杂志2005年“RNA干涉(RNAi)技术应用于哺乳动物细胞的研究策略”,希望能给从事或者准备从事RNAi相关实验的研究人员以帮助。哺乳... -
生物素-亲和素系统(BAS)ELISA和免疫组化技术
2011-11-7
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生物素-亲和素系统(BAS)ELISA和免疫组化技术20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem,BAS)标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术,即BAS-ELISA技术,它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为指示剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。生物素(biotin)是广泛分布于动植物体内的一种生长因子,又称辅酶R或维生素H。亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成。二... -
PCR-ELISA法诊断禽流感
2011-11-3
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PCR-ELISA法诊断禽流感PCR-ELISA是将一步RT-PCR技术与酶联免疫吸附法相结合,检测病毒的一项诊断技术。PCR的一对引物中,其中一个用生物素标记、另一个用地高辛标记,在酶标微孔板上用亲和素包被,PCR扩增后纯化片段加入微孔板中。此时,微孔板上包被的亲和素将与生物素标记引物上的生物素特异性结合而捕捉了PCR片段,然后在微IL板中加入辣根过氧化物酶标记的抗地高辛抗体,该抗体将与地高辛标记引物上的地高辛结合,从而形成亲和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗体-辣... -
酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断猪囊尾蚴病病
2011-11-1
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酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断猪囊尾蚴病病目前实验室开发的新型检测方法主要是以ELISA及改良的ELISA为主。分别用5种不同改良的ELISA平行检测囊虫抗体:ABC-ELISA、经典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA,试验结果差异不显著,说明方法学的选择主要依据习惯和试验的目的。N.S.Odashima(2002)用ELISA法诊断不同的患者群血清中抗体的种类,发现ELISA—lgG敏感度zui高,分别达到88.5%和93.2%,这说明该方...